Нарушение гемостаза при гемофилии Б обусловлено мутациями в гене F9 и, как следствие, продукцией клетками печени дефектного белка FIX, функциональная целостность которого критически важна для свёртывания крови. В рамках данного исследования проводится разработка и апробация стратегий генной терапии гемофилии Б, основанных на безвирусных векторах и таких технологиях редактирования генома, как gene knock-in и prime editing. Сравнительная оценка эффективности альтернативных стратегий осуществляется относительно классической генно-заместительной терапии на основе ААВ. Исследование включает как разработку прототипов универсальных и персонализированных генно-терапевтических препаратов, так и получение клеточных тест-систем и in vivo модели гемофилии Б.
Гемофилия Б — это наследственное, сцепленное с Х-хромосомой заболевание, которое приводит к нарушению гемокоагуляции вследствие дефицита или полного отсутствия функционального фактора свёртывания крови IX (FIX). Отличительными симптомами заболевания являются продолжительные посттравматические и спонтанные кровотечения, в том числе опасные для жизни (внутричерепные или затрагивающие внутренние органы).
В настоящее время терапия гемофилии Б возможна за счёт регулярного введения концентратов рекомбинантного FIX (rFIX) или однократной инфузии генно-терапевтического препарата на основе аденоассоциированного вируса (ААВ). Несмотря на то что развитие данных технологий позволило значительно увеличить продолжительность и качество жизни людей с гемофилией Б, они имеют ряд существенных недостатков. В случае с rFIX пациентам необходима пожизненная терапия с высоким риском формирования ингибирующих антител к рекомбинантному белку, а генная терапия с использованием AAВ ограничена из-за невозможности повторного введения, высокой стоимости и технической доступности только для взрослых пациентов, не имеющих нейтрализующих антител к вирусному капсиду.
Перспективным решением указанных проблем является разработка генно-терапевтических препаратов нового поколения, основанных на безвирусных векторах и передовых технологиях геномного редактирования (gene knock-in, prime editing). Потенциально, данный тип препаратов позволит охватить больше пациентов по сравнению с классической генно-заместительной терапией на основе ААВ, а также будет характеризоваться долгосрочным терапевтическим эффектом, низкой иммуногенностью и возможностью повторного введения.
Ярко выраженный интерес в области биомедицины к технологиям редактирования генома уже привёл к клиническому использованию CRISPR-Cas системы в терапии серповидно-клеточной анемии и бета-талассемии (препарат Casgevy), но в контексте лечения гемофилии Б данные технологии остаются недостаточно изучены и охарактеризованы. Поиски эффективной стратегии редактирования генома, направленной на восстановление функции фактора IX продолжаются, что делает исследования в данном направлении крайне актуальными и многообещающими.